Главная » 2013»Октябрь»28 » Эффективность применения препарата Кипферон® в лечении перинатальных инфекций у новорожденных детей
17:37
Эффективность применения препарата Кипферон® в лечении перинатальных инфекций у новорожденных детей
Инфекционные заболевания, вызванные вирусами и другими внутриклеточными
возбудителями, занимают одно из ведущих мест в структуре патологии
неонатального периода [1–3].
В возникновении, клиническом течении и исходе перинатальныхинфекций у новорожденныхдетей существенную роль играет состояние иммунной системы [4–5], поэтому в комплексном лечении таких больных немаловажное значение имеет иммунотропная терапия.
Для определения объема и вида комплексной терапии инфекционных заболеваний важно учитывать патогенетические механизмы их развития и влияние медикаментов на иммунную систему новорожденного ребенка.
Современные подходы к иммуномодулирующей терапии перинатальных внутриклеточных инфекций включают применение иммунобиологических препаратов направленного действия, таких как препараты рекомбинантных цитокинов, иммуноглобулинов, с учетом их значимости в патогенезе заболевания [6].
Кипферон® суппозитории для вагинального или ректального введения представляет собой комбинацию комплексного иммуноглобулинового препарата
(КИП) в количестве 60 мг, содержащего иммуноглобулины трех основных
классов – G, А и М, и рекомбинантного человеческого интерферона
альфа–2b, не менее 500 тыс. МЕ.
Клинические исследования и практика применения Кипферона® показали, что в препарате
сочетается антибактериальное, противовирусное, противовоспалительное и
иммуномодулирующее действие. Противовирусный и антибактериальный
эффекты препарата проявляются как во внутриклеточной,
так и внеклеточной среде организма за счет прямого действия на
возбудителей заболевания и стимуляции механизмов клеточного и
гуморального иммунитета [10]. Широкий спектр антител в составе
иммуноглобулинов КИПа позволяет препарату активно действовать на
разнообразные ассоциации микроорганизмов.
Целью работы явилось изучение эффективности использования Кипферона® в терапии перинатальных внутриклеточных инфекций у новорожденныхдетей с задержкой внутриутробного развития.
Материалы и методы
Под наблюдением находились 32 доношенных новорожденных ребенка с задержкой внутриутробного развития, у которых были диагностированы перинатальные внутриклеточные инфекции
– цитомегаловирусная (ЦМВИ), хламидийная и микст–инфекция
(хламидийно–цитомегаловирусная). Диагноз инфекций верифицировали
методами полимеразной цепной реакции (ПЦР) и иммуноферментного анализа
(ИФА). Идентификация ДНК Cytomegalovirus, Chlamydia trachomatis
осуществлялась в образцах крови методом ПЦР–амплификации на термоциклере
«Gradient Palm Cycler» («Corbett Research», Австралия). Детекция
продуктов ПЦР–амплификации проводилась методами фореза и флюоресценции
на аппарате Molecular Imager Gel Doc–XR 170–8170 (Bio–RAD) с помощью
набора реагентов «Ампли Сенс» (ФГУН «ЦНИИЭ» Роспотребнадзора,
г. Москва). Исследования проводились на базе ПЦР–лаборатории
Республиканского кожно–венерологического диспансера МЗ Удмуртской
Республики.
Специфические антитела класса G и M к вышеперечисленным возбудителям
определялись методом ИФА. Серологические исследования проводились в
клинической лаборатории Республиканской детской
клинической больницы МЗ Удмуртской Республики на иммуноферментном
анализаторе «Digiscan» (Австрия) с использованием набора реагентов
«Вектор–Бест» (г. Новосибирск).
Пациенты были распределены на две группы: основная – 17 новорожденныхдетей,
получавших в составе комплексной терапии Кипферон®; группа сравнения –
15 новорожденных детей, которые получали только комплексную терапию.
Препарат Кипферон® назначался после верификации инфекции (в возрасте
12,7±1,4 дня) по 1/2 свечи ректально 1 раз/сут. в течение 10 дней.
У детей обеих групп в динамике (10–14 дней и 20–24 дня) исследованы
показатели интерлейкина–4 (IL–4) и интерферона–γ (IFN–γ) в сыворотке
крови; секреторного IgA (sIgA) и сывороточных IgA, IgМ, IgG в
копрофильтратах.
Исследование уровней IL–4 и IFN–γ в сыворотке крови проводилось методом
твердофазного иммуноферментного анализа (тест–системы ИФА–IL–4» и
«ИФА–IFN–gamma» производства «ООО «Цитокин», г. Санкт–Петербург).
Анализы проводили в лаборатории иммуногенетики ФГУ «Медико–генетический
научный центр РАМН», г. Москва.
Количественное определение sIgA, сывороточных IgA, IgМ, IgG в
копрофильтратах проводили методом радиальной иммунодиффузии (G. Mancini,
А. Carbonara, 1965) в Московском НИИ эпидемиологии и микробиологии им.
Г.Н. Габричевского. В работе применяли 2 типа антисывороток:
антисыворотку к α–цепи, которая выявляет сывороточный и секреторный
IgA, и антисыворотку с секреторному компоненту (sc), которая определяет
только секреторный IgA. Производитель антисывороток – Московский НИИ
вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова.
Математическую обработку полученных результатов проводили по
общепринятым методам вариационной статистики. Вычисляли средние величины
показателей (М), стандартные ошибки средних величин (m) и среднее
квадратичное отклонение (σ). Достоверность различий между средними
величинами показателей в сравниваемых группах оценивали с помощью
критерия Стьюдента – t. Различия сравниваемых величин признавали
статистически достоверными при вероятности 95% (р<0,05) и выше.
Статистическую обработку полученного материала проводили с
использованием лицензионной программы «BioStat 2009».
Результаты и обсуждение
Дети обеих групп были сопоставимы по основным параметрам – гестационному
возрасту, антропометрическим данным, состоянию при рождении и в
динамике, виду и форме инфекции (табл. 1).
У большинства пациентов обеих групп диагностированы манифестные формы перинатальных
инфекций. Среди клинических проявлений инфекций преобладала пневмония
(60,0% в основной группе; 71,4% в группе сравнения). Поражение верхних
дыхательных путей выявлено у 20,0% новорожденных детей основной группы и
21,4% пациентов группы сравнения, гепатит I степени активности – у 20,0
и 7,1% детей соответственно. Состояние расценивалось как тяжелое у 1/5
пациентов в каждой группе.
Инфекция протекала в латентной форме у 2 больных в основной группе и 1
ребенка в группе сравнения. Их состояние расценивалось как
средне–тяжелое, что было обусловлено сопутствующей патологией.
Для оценки эффективности использования Кипферона® в
терапии перинатальных внутриклеточных инфекций проанализированы суточная
прибавка в весе за период лечения, количество курсов
проведенной антибактериальной терапии, продолжительность госпитализации
новорожденных детей. У пациентов до и после окончания курса Кипферона®
проведена оценка общеклинических показателей и уровней цитокинов крови, а
также иммуноглобулинов в копрофильтрате.
Было выявлено, что у детей, получивших в составе комплексной терапии
10–дневный курс Кипферона®, отмечалась значимо большая среднесуточная
прибавка в весе за период лечения (35,06±2,92 г, в
группе сравнения – 26,20±2,65 г, р<0,05). Детям основной группы
потребовалось меньшее количество курсов антибактериальной терапии –
1,24±0,24 в отличие от группы сравнения – 2,73±0,42 (р<0,01). Средняя
длительность госпитализации у новорожденных основной группы составила –
22,0±1,59 дней, в группе сравнения – 29,8±3,42 дней (р<0,05).
У новорожденных детей, получивших курс Кипферона®, отмечалась более
быстрая нормализация показателей гемограммы (табл. 2): восстановление
нормального количества лейкоцитов в периферической крови – до
10,25±1,47x109/л (р<0,02), с достоверным уменьшением относительного
числа молодых форм нейтрофилов.
Исходный уровень цитокинов в сыворотке крови детей обеих групп не имел значимых отличий и представлен в таблице 3.
У новорожденных детей с перинатальными инфекциями уровень интерферона– в сыворотке крови до лечения
составил 115,28±13,50 пкг/мл. У детей, получивших курс Кипферона®, его
уровень стал достоверно ниже и составил 76,03±7,87 пкг/мл (р<0,05).
Интерферон– обладает противовирусным и уникальным иммуномодулирующим
действием. Он опосредует взаимодействие между Т–лимфоцитами и
макрофагами, усиливает цитотоксическую активность клеток иммунной
системы, играет важную роль в дифференцировке и созревании Т–лимфоцитов,
активирует систему естественных киллерных клеток, обладающих
неспецифической цитотоксичностью, что позволяет подавлять развитие
инфекции, в первую очередь, вызванную внутриклеточными возбудителями, на
ранних стадиях [6–8]. Снижение уровня IFN–γ у детей основной группы в
сочетании с положительной клинической динамикой может свидетельствовать о
стихании воспалительного процесса и подавлении размножения
внутриклеточных возбудителей, являющихся индукторами синтеза IFN–γ.
В группе сравнения показатель IFN–γ остался практически неизменным
(112,11±29,51 пкг/мл).
Интерлейкин–4, являясь противовоспалительным цитокином, принимает
участие в иммунном ответе и воспалительных реакциях. По сравнению с
исходным (4,27±0,47 пкг/мл), уровень IL–4 у детей с применением и без применения Кипферона® в терапии имел тенденцию к снижению (3,28±0,56 и 3,20±0,63 пкг/мл), но без достоверной разницы в обеих группах.
Первой линией специфической защиты слизистых кишечника и доминирующим
иммуноглобулином является секреторный IgA (sIgA), синтезируемый
плазматическими клетками слизистой в кооперации с эпителиальными
клетками, образующими секреторный компонент данного иммуноглобулина. В
результате взаимодействия с гликокаликсом sIgA удерживается около
эпителиальных клеток, подавляя колонизацию эпителия инфекционными
агентами и сдерживая приток растворимых антигенов [9].
При анализе показателей sIgA в копрофильтратах у новорожденных детей с перинатальными инфекциями было отмечено, что на фоне лечения
Кипфероном® происходило достоверное повышение его уровня (с 0,032±0,010
до 0,079±0,020 мг/мл, р<0,05). В группе сравнения выявлена
аналогичная тенденция, но без достоверной разницы (с 0,032±0,010 до
0,052±0,020 мг/мл) (табл. 4).
Сывороточные иммуноглобулины не обеспечивают локальной защиты. Они
накапливаются в кишечнике только при наличии высоких уровней в сыворотке
крови. Сывороточные антитела проникают в просвет кишечника в результате
пассивной транссудации интерстициальной жидкости через покровный
эпителий. Проницаемость слизистых для сывороточных белков, поступающих
в секреты, увеличивается при воспалительных процессах.
В группе детей, получавших лечение Кипфероном®, зафиксировано значимое
снижение уровня сывороточного IgA (c 0,033±0,012 до 0,0088±0,003 мг/мл,
р<0,05) и уровня IgG (c 0,016±0,007 до 0,013±0,008 мг/мл, р<0,05) в
копрофильтрате. В группе сравнения уровень сывороточного IgA также имел
тенденцию к снижению (р>0,05), а показатель IgG остался неизменным.
У детей обеих групп в процессе лечения отмечалось снижение уровня IgM (с
0,028±0,010 до 0,009±0,003 мг/мл в основной группе и до 0,015±0,003
мг/мл в группе сравнения) в копрофильтрате, но достоверной разницы в
показателях не выявлено.
Выявленные сдвиги в содержании иммуноглобулинов в копрофильтратах могут
расцениваться как результат положительного влияния препарата Кипферон®
на показатели местного неспецифического иммунитета.
Заключение
Результаты исследования свидетельствуют о том, что включение Кипферона® в
комплексную терапию перинатальных внутриклеточных инфекций у доношенных
новорожденных детей с задержкой внутриутробного развития повышает эффективность лечения, способствует более быстрому улучшению состояния пациентов и сокращению сроков госпитализации.
Исследование показателей иммунного статуса у детей, получавших
Кипферон®, выявило нормализацию продукции IFN–γ, повышение уровня
секреторного IgA в копрофильтрате и снижение содержания сывороточных
IgG. Кроме того, назначение Кипферона® способствует уменьшению
воспалительных изменений кишечника, о чем свидетельствует снижение
содержания IgA в копрофильтратах.
